标准解读
《GB 15193.20-2014 食品安全国家标准 体外哺乳类细胞TK基因突变试验》相比于其前kok电子竞技《GB 15193.20-2003 TK基因突变试验》,主要在以下几个方面进行了更新和调整:
-
适用范围扩展:2014kok电子竞技标准不仅适用于食品及其原料的安全性评价,还明确了其也可用于食品添加剂、食品相关产品等的遗传毒性评估,覆盖范围更加广泛。
-
技术方法更新:新kok电子竞技标准引入了更先进的检测技术和分析方法,提高了试验的灵敏度和准确性。例如,对细胞培养条件、试验终点的判定以及突变结果的统计分析方法都做了更具体的规定,以适应科学技术的进步。
-
试验设计优化:2014kok电子竞技标准对试验的设计和操作流程进行了优化,包括增加了平行试验的要求,明确了正负对照组的设置原则,以及对剂量选择和梯度设置给出了更科学的指导,确保试验结果的可靠性和可重复性。
-
结果判定标准细化:新标准详细规定了基因突变的判定标准和分类方法,为实验结果提供了更为明确的评判依据,有助于减少主观判断带来的误差。
-
安全性要求提升:考虑到实验操作的安全性,2014kok电子竞技标准在实验室操作规范、生物安全防护措施等方面提出了更严格的要求,强调了实验人员的培训与防护,以及实验废弃物的处理规定。
-
标准与国际接轨:更新后的标准在很大程度上参考了国际上通用的测试指南和协议,如OECD的相关测试指南,增强了中国食品安全评价标准与国际标准的一致性和互认性。
-
术语定义和表述清晰化:为确保标准的准确理解和执行,2014kok电子竞技标准对相关专业术语进行了更精确的定义,并对整个文本表述进行了优化,使之更加规范和易于理解。
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- 现行
- 正在执行有效
- 2014-12-24 颁布
- 2015-05-01 实施
kok电子竞技:文档简介
中华人民共和国国家标准
GB1519320—2014
.
食品安全国家标准
体外哺乳类细胞TK基因突变试验
2014-12-24发布2015-05-01实施
中华人民共和国发布
国家卫生和计划生育委员会
GB1519320—2014
.
前言
本标准代替基因突变试验
GB15193.20—2003《TK》。
本标准与相比主要变化如下
GB15193.20—2003,:
标准名称修改为食品安全国家标准体外哺乳类细胞基因突变试验
———“TK”;
修改了范围
———;
增加了术语和定义
———;
修改了试验目的和原理
———;
增加了代谢活化系统
———;
增加了和选择培养基的配制方法
———THMGTHG;
增加了和选择培养基的配制方法
———CHATCHT;
增加了三氟胸苷的配制方法
———;
增加了磷酸盐缓冲液的配制方法
———;
修改了受试物剂量设定的要求
———;
修改了对照的设定
———;
增加了备选细胞系及相应的试验方法及数据处理
———;
增加了试验kok电子竞技的要求
———;
增加了试验的解释的要求
———。
Ⅰ
GB1519320—2014
.
食品安全国家标准
体外哺乳类细胞TK基因突变试验
1范围
本标准规定了体外哺乳类胸苷激酶基因突变试验的基本试验方法与技术
(thymidinekinase,TK)
要求
。
本标准适用于评价受试物的致突变作用
。
2术语和定义
21TK基因
.
哺乳类动物的胸苷激酶基因人类的基因定位于号染色体长臂远端小鼠的则定位于
。TK17;
号染色体
11。
22突变频率
.
在某种细胞系中某一特定基因突变型的细胞集落占细胞集落总数的比例单位通常为-6
,()()(10)。
3试验目的和原理
基因突变试验的检测终点是基因的突变基因突变属于常染色体基因突变
TKTK。TK。
基因的产物胸苷激酶在体内催化从脱氧胸苷生成胸苷酸的反应在正常情况
TK(TdR)(TMP)。
下此反应并非生命所必需原因是体内的主要来自于脱氧尿嘧啶核苷酸即由胸苷酸
,,TMP(dUMP),
合成酶催化的甲基化反应生成但如在细胞培养物中加入胸苷类似物如三氟胸苷即
dUMPTMP。(,
则在胸苷激酶的催化下可生成三氟胸苷酸进而掺入造成致死
trifluorothymidine,TFT),TFT,DNA,
性突变故细胞不能存活若基因发生突变导致胸苷激酶缺陷则不能磷酸化亦不能掺入
,。TK,,TFT,
故突变细胞在含有的培养基中能够生长即表现出对的抗性根据突变集落形成数
DNA,TFT,TFT。,
可计算突变频率从而推断受试物的致突变性在基因突变试验结果观察中可发现两类明显不同
,。TK
的集落即大小集落细胞或正常生长缓慢生长集落细胞有研究表明大集落正常
,/(L5178Y)/(TK6),,/
生长集落主要由点突变或较小范围的缺失等引起而小集落缓慢生长集落主要由较大范围的染色体畸
,/
变或由涉及调控细胞增殖的基因缺失引起
,。
4仪器和试剂
41仪器
.
实验室常用设备低温冰箱或液氮罐生物安全柜细胞培养箱倒置显微镜离心机
、(-80℃)、、、、。
1
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