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总大肠杆菌检测作业指导书总大肠杆菌检测作业指导书总大肠杆菌检测作业指导书总大肠杆菌检测作业指导书培育基1.1乳糖蛋白胨培育液；1.2三倍乳糖蛋白胨培育液；1.3品红亚硫酸钠培育基；1.4伊红美蓝培育基。2．步骤2.1生活饮用水2.1.1初发酵试验：在二个装有已灭菌的50ml三倍浓缩乳糖蛋白胨培育液的大试管或烧瓶中，以无菌操作各加入已充分混匀的水样100ml；在10支装有已灭菌的5ml三倍浓缩乳糖蛋白胨培育液的试管中（内有倒管），以无菌操作加入充分混匀的水样10ml，混匀后置于37℃恒温箱培育24h。2.1.2平板分别：经初发酵试验培育24h后，发酵试管盐酸变黄为产酸，小玻璃倒管内有气泡为产气，将产酸产气及只产酸发酵管，分别用接种环划线接种于品红亚硫酸钠培育基上，置于37℃中培育18~24h，精选符合以下特点的菌落，取菌落的一小部分进行涂片、革兰氏染色、镜检。2.1.3复发酵试验：上述涂片镜检的菌落如为革兰氏阴性无芽孢的杆菌，则精选该菌落的另一部分接种于一般浓度乳糖蛋白胨培育液中，每管可接种分别自同一初发酵管的最典型菌落1~3个，报告每升水样中的大肠菌群数。2.2水源水2.2.1将水样作1:10稀释；2.2.2于各装有5ml三倍浓缩乳糖蛋白胨培育液的五个试管中，各加10ml水样；于各装有10ml乳糖蛋白胨培育液的五个试管中，各加1ml水样；于各装有10ml乳糖蛋白胨培育液的五个试管中，各加入1ml1:10稀释的水样。合计15管，三个稀释度，将各管充分混匀，置于37℃恒温箱培育24h。2.2.3平板分别：经初发酵试验培育24h后，发酵试管盐酸变黄为产酸，小玻璃倒管内有气泡为产气，将产酸产气及只产酸发酵管，分别用接种环划线接种于品红亚硫酸钠培育基上，置于37℃中培育18~24h，精选符合以下特点的菌落，取菌落的一小部分进行涂片、革兰氏染色、镜检。2.2.4复发酵试验：上述涂片镜检的菌落如为革兰氏阴性无芽孢的杆菌，则精选该菌落的另一部分接种于一般浓度乳糖蛋白胨培育液中，每管可接种分别自同一初发酵管的最典型菌落1~3个，报告每升水样中的大肠菌群数。2.2.5依据证明总大肠菌群存在的阳性管数查表即求得每100ml水样中存在的总大肠菌群数。内容总结

（1）总大肠杆菌检测作业指导书

培育基

1.1乳糖蛋白胨培育液

（2）1.4伊红美蓝培育基

（3）2．步骤

2.1生活饮用水

2.1.1初发酵试验：在二个装有已灭菌的50ml

三倍浓缩乳糖蛋白胨培育液的大试管或烧瓶中，以

无菌操作各加入已充分混匀的水样100ml

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