KNA文库构建记录(举例3)_第1页
KNA文库构建记录(举例3)_第2页
KNA文库构建记录(举例3)_第3页
KNA文库构建记录(举例3)_第4页
全文预览已结束

下载本文档

kok电子竞技权说明：本文档由用户提供并上传，收益归属内容提供方，若内容存在侵权，请进行举报或认领

kok电子竞技:文档简介

操作人/日期：复核人/日期：第页项目名称：项目编号：KNA文库构建记录文件制定依据：《KNA文库构建标准操作规程V2.1.0》记录编号：实验日期：实验人员：实验目的实验材料gDNA序号gDNA编号gDNA（ng/?l）样本编号样本类型备注主要试剂耗材名称生产厂家货号批号备注dsDNAFragmentaseNEB10×FragmentaseReactionBufferv2NEBBuffer1北京贝瑞和康Enzyme1北京贝瑞和康Buffer2北京贝瑞和康Enzyme2北京贝瑞和康Truseq接头（301-396）IDTEBBufferQiagenAgencourtAMPureXPbeadsBeckman无水乙醇北京化工厂ddH2OTiangenRT120-02主要仪器设备名称固定资产编号或内部编号备注PCR仪实验过程实验操作过程参照《科诺安文库构建标准操作规程v2.1.0》1、片段化DNA(10ng)1-8?l10×FragmentaseReactionBufferv21?ldsDNAFragmentase1?lddH2O补足10?lFinalVolume10?l37℃10min打断①移取?ldsDNAFragmentase和?l10×FragmentaseReactionBufferv2，涡旋充分混匀，配得混合液MIX-1，待用。②片段化反应体系配制gDNA编号gDNA用量（?l）MIX-1用量（?l）EBBuffer用量（?l）2、Fragmentase灭活打断后BUF1打断处理DNA10?lBUF17?lFinalVolume17?l65℃10min灭活。3、末端补平灭活后体系补足ddH2O，并加入加ENZ1。灭活后体系17?lENZ11.5?lddH2O30.5?lFinalVolume49?l程序如下：温度时间37℃20min72℃20min4℃5min4、Adapter连接按照下表进行加接头反应：末端补平反应终体积49?lBUF225?lENZ21?lAdapter4?lFinalVolume79?l程序如下：温度时间20℃15min65℃10min4℃5min①移取?lBuffer2和?lEnzyme2，涡旋充分混匀，配得混合液MIX-2，待用。②加接头反应体系配制。5、纯化处理①配制80%乙醇溶液，待用。②加入28?lXP回收，22?lEB洗脱。6、稀释文库100倍，送检。序号gDNA编号Index文库名称备注

人人文库> 全部分类> 应用文书 > 作业kok电子竞技

温馨提示

  • 1. 本站所有资源如无特殊说明，都需要本地电脑安装OFFICE2007和PDF阅读器。图纸软件为CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
  • 2. 本站的文档不包含任何第三方提供的附件图纸等，如果需要附件，请联系上传者。文件的所有权益归上传用户所有。
  • 3. 本站RAR压缩包中若带图纸，网页内容里面会有图纸预览，若没有图纸预览就没有图纸。
  • 4. 未经权益所有人同意不得将文件中的内容挪作商业或盈利用途。
  • 5. 人人文库网仅提供信息存储空间，仅对用户上传内容的表现方式做保护处理，对用户上传分享的文档内容本身不做任何修改或编辑，并不能对任何下载内容负责。
  • 6. 下载文件中如有侵权或不适当内容，请与我们联系，我们立即纠正。
  • 7. 本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。

kok电子竞技:最新文档

评论

0/150

提交评论