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关于免疫学检测免疫学预防第一页,共二十五页,2022年,8月28日主要内容第一节免疫细胞及其亚群的检测(自学)第二节免疫分子的检测(重点)一、抗原、抗体的检测(一)抗原-抗体反应的特点(自学)(二)抗原-抗体反应的影响因素(自学)(三)抗原-抗体反应的类型和检测方法(重点)1.沉淀反应(自学)2.凝集反应(自学)3.补体参与的抗原抗体反应(自学)4.免疫标记技术(重点)5.蛋白芯片技术(自学)二、细胞因子的检测(自学)第三节免疫学检测的临床应用第二页,共二十五页,2022年,8月28日第二节免疫分子的检测(三)抗原抗体反应的类型和检测方法4.免疫标记技术(1)免疫荧光技术(3)放射免疫测定法(2)酶免疫测定法……….第三页,共二十五页,2022年,8月28日
Ag-Ab+标记技术。用以检测Ag或Ab的一种试验方法。标记:荧光素、酶、放射性同位素等。标记后的Ag或Ab仍有原有的生物学活性。特点:敏感性高、特异性强、应用范围广,可定性、定量、定位。4、免疫标记技术免疫荧光技术免疫酶测定法放射免疫测定法发光免疫分析免疫胶体金技术免疫印迹技术第四页,共二十五页,2022年,8月28日Ag荧光素Ag放射性同位素酶荧光显微镜酶标检测仪射线测量仪化学发光物、金属颗粒等用荧光素、放射性同位素、酶、金属颗粒及化学(或生物)发光剂等作为追踪物,标记抗体或抗原进行的抗原抗体反应免疫标记技术第五页,共二十五页,2022年,8月28日Ag硝酸纤维素膜和醋酸纤维素膜利用吸附载体作为固相进行抗原抗体反应吸附载体聚苯乙烯微量反应板(酶标板)第六页,共二十五页,2022年,8月28日Ag聚苯乙烯微量反应板(酶标板)封阻/封闭(block)包被(coat)AgAg第七页,共二十五页,2022年,8月28日荧光素:异硫氰酸荧光素(FITC)---------黄绿色荧光四乙基罗丹明(RB200)-----------橙色荧光四甲基异硫氰酸罗丹明(TMRITC)--橙红色第八页,共二十五页,2022年,8月28日待检标本(固定在玻片上)+已知荧光抗体→洗去游离的荧光Ab→干燥后,荧光显微镜下观察。用途:病毒感染的细胞、携带某种特异性Ag的细胞的检测。a、直接荧光法问题思考:直接法会给我们的检测工作带来什么不方面?检测多种Ag需制备多种相应的荧光抗体标记。第九页,共二十五页,2022年,8月28日用来检测标本中未知的Ag。检测Ag。未标记Ab+待检Ag(未知)→(冲洗)+荧光标记抗Ab→冲洗、干燥、荧光显微镜下观察。b、间接荧光法优点:敏感性高,制备一种荧光标记抗Ab即可对多种Ab-Ab系统进行检测。缺点:易出现非特异性荧光。第十页,共二十五页,2022年,8月28日直接酶标法间接酶标法辣根过氧化物酶(HRP)碱性磷酸酶抗抗体、二抗酶联免疫吸附试验(ELISA)第十一页,共二十五页,2022年,8月28日双抗体夹心法——用已知抗体检测未知抗原第十二页,共二十五页,2022年,8月28日间接法——用已知抗原检测未知抗体第十三页,共二十五页,2022年,8月28日“免疫标记技术”小结荧光标记法酶联免疫吸附试验直接荧光法间接荧光法夹心法间接法已知抗体包被于固相载体,加待测抗原,再加酶标抗体,显色;反之亦然(先加已知抗原)标记抗原或者一抗抗原包被于固相载体,加酶标一抗,再加酶标二抗,显色标记二抗第十四页,共二十五页,2022年,8月28日课堂测试1、下列哪项不是免疫标记技术的特点_______A、提高了反应的灵敏度B、反应的特异性更强C、能进行定量检测D、能进行定性检测E、具有快速的优点2、下列免疫学测定方法灵敏度最高的是______A、沉淀反应B、凝集反应C、ELISAD、放射免疫测定E、补体结合试验3、免疫荧光抗体技术间接法是将荧光素标记在______A、被检抗原上
B、已知抗体上C、抗Ig抗体上
D、Ag—Ab复合物上E、已知抗原上第十五页,共二十五页,2022年,8月28日4、ELISA的双抗体夹心法,固相载体的标记物是_______A、待检抗原B、已知抗原C、已知抗体D、酶标抗体E、酶标抗原5、检测可溶性抗原可以用______A、直接凝集反应B、酶联免疫吸附实验C、放射性免疫分析法D、直接荧光标记6、间接标记技术一般主要用于检测______A、未知抗原B、未知抗体C、两者都可以第十六页,共二十五页,2022年,8月28日第二十四章免疫学防治第一节免疫预防(重点)一、疫苗(重点)二、疫苗的基本要求(自学)三、计划免疫和预防接种注意事项(了解)第二节免疫治疗(自学)第十七页,共二十五页,2022年,8月28日老问题思考第一次患严重疾病而病愈,第二次遭受同一严重疾。疾〗峁嵩跹吭趺唇馐停康谑艘,共二十五页,2022年,8月28日人工主动免疫第十九页,共二十五页,2022年,8月28日初次抗原刺激再次抗原刺激时间(天)人工被动免疫第二十页,共二十五页,2022年,8月28日人工主动免疫和人工被动免疫的特点人工主动免疫人工被动免疫输入物质抗原抗体等免疫力出现时间慢(2-3周)快(输注即生效)免疫力维持时间数月至数年2-3周主要用途预防治疗或紧急预防接种次数1到3次1次第二十一页,共二十五页,2022年,8月28日是给机体输入抗原性物质,剌激机体产生特异性免疫力一、疫苗1.灭活疫苗/死疫苗2.减毒活疫苗3.类毒素4.新型疫苗第二十二页,共二十五页,2022年,8月28日三、计划免疫和预防接种注意事项有计划地使用生物制品(主要是疫苗)进行预防接种,提高人群的免疫水平第二十三页,共二十五页,2022年,8月28日我国推行的儿童基础免疫程序第二十四页,共二十五页,2022年,8月28日感谢大家观看2022/12/16第二十五页,共二十五页,2022年,8月28日
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